Клеточные модели для исследования роли экстрацеллюлярного домена муцина MUC1 человека в метастазировании

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

На основе экспрессионного вектора pEGFP-N3 получены генетические конструкции, кодирующие различные комбинации функциональных фрагментов муцина MUC1 человека, а также маркеры для идентификации синтезируемых химерных белков (FLAG-эпитоп, располагающийся в N-концевой области синтезируемых белков, и EGFP, имеющий С-концевую локализацию). Этими конструкциями трансфицировали клетки линии HT-29. Стабильно трансфицированные клетки были охарактеризованы с использованием проточного цитофлуориметра. Высокий уровень экспрессии рекомбинантных белков на фоне низкого уровня эндогенного муцина MUC1 в полученных клетках был подтвержден методом ПЦР в реальном времени. При помощи флуоресцентной микроскопии была показана мембранная локализация химерных белков. Полученные клетки могут служить моделью MUC1-экспрессирующей формы рака, а также использоваться для исследования роли различных функциональных фрагментов муцина MUC1 в метастазировании.

Об авторах

М. С. Сыркина

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова; Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН

Автор, ответственный за переписку.
Email: krimsy@yandex.ru
Россия

М. А. Рубцов

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

Д. М. Поташникова

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

Ю. Д. Кондратенко

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

А. А. Докрунова

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

В. П. Вейко

Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

Список литературы

  1. Wyld L., Gutteridge E., Pinder S.E., James J.J., Chan S.Y., Cheung K.L., Robertson J.F., Evans A.J. // Br. J. Cancer. 2003, V.89, №2, P.284-290
  2. Haier J., Nasralla M., Nicolson G.L. // Br. J. Cancer. 1999, V.80, №12, P.1867-1874
  3. Doerr M.E., Jones J.I. // J. Biol. Chem. 1996, V.271, №5, P.2443-2447
  4. Varki A. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994, V.91, №16, P.7390-7397
  5. Qi J., Chen N., Wang J., Siu C.H. // Mol. Biol. Cell. 2005, V.16, №9, P.4386-4397
  6. Hilkens J., Ligtenberg M.J., Vos H.L., Litvinov S.V. // Trends Biochem. Sci. 1992, V.17, №9, P.359-363
  7. Dong Y., Walsh M.D., Cummings M.C., Wright R.G., Khoo S.K., Parson P.G., McGuckin M.A. // J. Pathol. 1997, V.183, №3, P.311-317
  8. Hinoda Y., Ikematsu Y., Horinochi M., Sato S., Yamamoto K., Nakano T., Fukui M., Suehiro Y., Hamanaka Y., Nishikawa Y. // J. Gastroenterol. 2003, V.38, №12, P.1162-1166
  9. McGuckin M.A., Walsh M.D., Hohn B.G., Ward B.G., Wright R.G. // Hum. Pathol. 1995, V.26, №4, P.432-439
  10. Li Y., Ren J., Yu W., Kuwahara H., Yin L., Carraway K.L. 3rd., Kufe D. // J. Biol. Chem. 2001, V.276, №38, P.35239-35242
  11. Schroeder J.A., Adriance M.C., Thompson M.C., Camenisch T.D., Gendler S.J. // Oncogene. 2003, V.22, №9, P.1324-1332
  12. Burchell J., Taylor-Papadimitriou J., Boshell M., Gendler S., Duhig T. // Int. J. Cancer. 1989, V.44, №4, P.691-696
  13. Rahn J.J., Chow J.W., Horne G.J., Mah B.K., Emerman J.T., Hoffman P., Hugh J.C. // Clin. Exp. Metastasis. 2005, V.22, №6, P.475-483
  14. Bernier A.J., Zhang J., Lillehoj E., Shaw A.R., Gunasekara N., Hugh J.C. // Mol. Cancer. 2011, V.10, №93, P.1295-1304
  15. Roy L.D., Sahraei M., Subramani D.B., Besmer D., Nath S., Tinder T.L., Bajaj E., Shanmugam K., Lee Y.Y., Hwang S.I. // Oncogene. 2011, V.30, №12, P.1449-1459
  16. Bafna S., Kaur S., Batra S.K. // Oncogene. 2010, V.29, №20, P.2893-2904
  17. Ren J., Bharti A., Raina D., Chen W., Ahmad R., Kufe D. // Oncogene. 2006, V.25, №1, P.20-31
  18. Wei X., Xu H., Kufe D. // Cancer Cell. 2005, V.7, №2, P.167-178
  19. Nakamori S., Kameyama M., Imaoka S., Furukawa H., Ishikawa O., Sasaki Y., Izumi Y., Irimura T. // Dis. Colon. Rectum. 1997, V.40, №4, P.420-431
  20. Burdick M.D., Harris A., Reid C.J., Iwamura T., Hollingsworth M.A. // J. Biol. Chem. 1997, V.272, №39, P.24198-24202
  21. Julien S., Lagadec C., Krzewinski-Recchi M.A., Courtand G., Le_Bourhis X., Delannoy P. // Breast Cancer Res. Treat. 2005, V.90, №1, P.77-84
  22. Gong E., Hirohashi S., Shimosato Y., Watanabe M., Ino Y., Teshima S., Kodaira S. // J. Natl. Cancer Inst. 1985, V.75, №3, P.447-454
  23. Inufusa H., Kojima N., Yasutomi M., Hakomori S. // Clin. Exp. Metastasis. 1991, V.9, №3, P.245-257
  24. Gendler S.J., Lanscater C.A., Taylor-Papadimitriou J., Duhig T., Peat N., Burchell J., Pemberton L., Lalani E.N., Wilson D. // J. Biol. Chem. 1990, V.265, №25, P.15286-15293
  25. Gul’ko L.B., Pavlova O.V., Diakov N.A., Okorokova N.A., Ratmaova K.I., Logunova N.N., Bobreneva R.A., Makarov V.A., Jurin V.L., Veiko V.P. // Bioorgan. Chimiya (Bioorgan. Chemistry). 2000, №6, P.423-432
  26. Imbert Y., Darling D.S., Jumblatt M.M., Foulks G.N., Couzin E.G., Steele P.S., Young W.W. Jr. // Exp. Eye Res. 2006, V.83, №3, P.493-501
  27. Ligtenberg M.J., Kruijshaar L., Buijs F., van Meijer M., Litvinov S.V., Hilkens J. // J. Biol. Chem. 1992, V.267, №9, P.6171-6177
  28. Schroeder J.A., Thompson M.C., Gardner M.M., Gendler S.J. // J. Biol. Chem. 2001, V.276, №16, P.13057-13064
  29. Rahn J.J., Shen Q., Mah B.K., Hugh J.C. // J. Biol. Chem. 2004, V.279, №28, P.29386-29390
  30. Julian J., Dharmaraj N., Carson D.D. // J. Cell. Biochem. 2009, V.108, №4, P.802-815
  31. Pemberton L.F., Rughetti A., Taylor-Papadimitriou J., Gendler S.J. // J. Biol. Chem. 1996, V.271, №4, P.2332-2340

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Сыркина М.С., Рубцов М.А., Поташникова Д.М., Кондратенко Ю.Д., Докрунова А.А., Вейко В.П., 2014

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.