Клеточные модели для исследования роли экстрацеллюлярного домена муцина MUC1 человека в метастазировании

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

На основе экспрессионного вектора pEGFP-N3 получены генетические конструкции, кодирующие различные комбинации функциональных фрагментов муцина MUC1 человека, а также маркеры для идентификации синтезируемых химерных белков (FLAG-эпитоп, располагающийся в N-концевой области синтезируемых белков, и EGFP, имеющий С-концевую локализацию). Этими конструкциями трансфицировали клетки линии HT-29. Стабильно трансфицированные клетки были охарактеризованы с использованием проточного цитофлуориметра. Высокий уровень экспрессии рекомбинантных белков на фоне низкого уровня эндогенного муцина MUC1 в полученных клетках был подтвержден методом ПЦР в реальном времени. При помощи флуоресцентной микроскопии была показана мембранная локализация химерных белков. Полученные клетки могут служить моделью MUC1-экспрессирующей формы рака, а также использоваться для исследования роли различных функциональных фрагментов муцина MUC1 в метастазировании.

Об авторах

М. С. Сыркина

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова; Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН

Автор, ответственный за переписку.
Email: krimsy@yandex.ru
Россия

М. А. Рубцов

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

Д. М. Поташникова

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

Ю. Д. Кондратенко

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

А. А. Докрунова

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

В. П. Вейко

Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН

Email: krimsy@yandex.ru
Россия

Список литературы

  1. Wyld L., Gutteridge E., Pinder S.E., James J.J., Chan S.Y., Cheung K.L., Robertson J.F., Evans A.J. // Br. J. Cancer. 2003, V.89, №2, P.284-290
  2. Haier J., Nasralla M., Nicolson G.L. // Br. J. Cancer. 1999, V.80, №12, P.1867-1874
  3. Doerr M.E., Jones J.I. // J. Biol. Chem. 1996, V.271, №5, P.2443-2447
  4. Varki A. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1994, V.91, №16, P.7390-7397
  5. Qi J., Chen N., Wang J., Siu C.H. // Mol. Biol. Cell. 2005, V.16, №9, P.4386-4397
  6. Hilkens J., Ligtenberg M.J., Vos H.L., Litvinov S.V. // Trends Biochem. Sci. 1992, V.17, №9, P.359-363
  7. Dong Y., Walsh M.D., Cummings M.C., Wright R.G., Khoo S.K., Parson P.G., McGuckin M.A. // J. Pathol. 1997, V.183, №3, P.311-317
  8. Hinoda Y., Ikematsu Y., Horinochi M., Sato S., Yamamoto K., Nakano T., Fukui M., Suehiro Y., Hamanaka Y., Nishikawa Y. // J. Gastroenterol. 2003, V.38, №12, P.1162-1166
  9. McGuckin M.A., Walsh M.D., Hohn B.G., Ward B.G., Wright R.G. // Hum. Pathol. 1995, V.26, №4, P.432-439
  10. Li Y., Ren J., Yu W., Kuwahara H., Yin L., Carraway K.L. 3rd., Kufe D. // J. Biol. Chem. 2001, V.276, №38, P.35239-35242
  11. Schroeder J.A., Adriance M.C., Thompson M.C., Camenisch T.D., Gendler S.J. // Oncogene. 2003, V.22, №9, P.1324-1332
  12. Burchell J., Taylor-Papadimitriou J., Boshell M., Gendler S., Duhig T. // Int. J. Cancer. 1989, V.44, №4, P.691-696
  13. Rahn J.J., Chow J.W., Horne G.J., Mah B.K., Emerman J.T., Hoffman P., Hugh J.C. // Clin. Exp. Metastasis. 2005, V.22, №6, P.475-483
  14. Bernier A.J., Zhang J., Lillehoj E., Shaw A.R., Gunasekara N., Hugh J.C. // Mol. Cancer. 2011, V.10, №93, P.1295-1304
  15. Roy L.D., Sahraei M., Subramani D.B., Besmer D., Nath S., Tinder T.L., Bajaj E., Shanmugam K., Lee Y.Y., Hwang S.I. // Oncogene. 2011, V.30, №12, P.1449-1459
  16. Bafna S., Kaur S., Batra S.K. // Oncogene. 2010, V.29, №20, P.2893-2904
  17. Ren J., Bharti A., Raina D., Chen W., Ahmad R., Kufe D. // Oncogene. 2006, V.25, №1, P.20-31
  18. Wei X., Xu H., Kufe D. // Cancer Cell. 2005, V.7, №2, P.167-178
  19. Nakamori S., Kameyama M., Imaoka S., Furukawa H., Ishikawa O., Sasaki Y., Izumi Y., Irimura T. // Dis. Colon. Rectum. 1997, V.40, №4, P.420-431
  20. Burdick M.D., Harris A., Reid C.J., Iwamura T., Hollingsworth M.A. // J. Biol. Chem. 1997, V.272, №39, P.24198-24202
  21. Julien S., Lagadec C., Krzewinski-Recchi M.A., Courtand G., Le_Bourhis X., Delannoy P. // Breast Cancer Res. Treat. 2005, V.90, №1, P.77-84
  22. Gong E., Hirohashi S., Shimosato Y., Watanabe M., Ino Y., Teshima S., Kodaira S. // J. Natl. Cancer Inst. 1985, V.75, №3, P.447-454
  23. Inufusa H., Kojima N., Yasutomi M., Hakomori S. // Clin. Exp. Metastasis. 1991, V.9, №3, P.245-257
  24. Gendler S.J., Lanscater C.A., Taylor-Papadimitriou J., Duhig T., Peat N., Burchell J., Pemberton L., Lalani E.N., Wilson D. // J. Biol. Chem. 1990, V.265, №25, P.15286-15293
  25. Gul’ko L.B., Pavlova O.V., Diakov N.A., Okorokova N.A., Ratmaova K.I., Logunova N.N., Bobreneva R.A., Makarov V.A., Jurin V.L., Veiko V.P. // Bioorgan. Chimiya (Bioorgan. Chemistry). 2000, №6, P.423-432
  26. Imbert Y., Darling D.S., Jumblatt M.M., Foulks G.N., Couzin E.G., Steele P.S., Young W.W. Jr. // Exp. Eye Res. 2006, V.83, №3, P.493-501
  27. Ligtenberg M.J., Kruijshaar L., Buijs F., van Meijer M., Litvinov S.V., Hilkens J. // J. Biol. Chem. 1992, V.267, №9, P.6171-6177
  28. Schroeder J.A., Thompson M.C., Gardner M.M., Gendler S.J. // J. Biol. Chem. 2001, V.276, №16, P.13057-13064
  29. Rahn J.J., Shen Q., Mah B.K., Hugh J.C. // J. Biol. Chem. 2004, V.279, №28, P.29386-29390
  30. Julian J., Dharmaraj N., Carson D.D. // J. Cell. Biochem. 2009, V.108, №4, P.802-815
  31. Pemberton L.F., Rughetti A., Taylor-Papadimitriou J., Gendler S.J. // J. Biol. Chem. 1996, V.271, №4, P.2332-2340

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Сыркина М.С., Рубцов М.А., Поташникова Д.М., Кондратенко Ю.Д., Докрунова А.А., Вейко В.П., 2014

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах