Регуляция экспрессии целевого белка (трансгена) в составе ДНК аденовирусного вектора с помощью агонистов Toll-подобных рецепторов

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Нереплицирующиеся рекомбинантные аденовирусные векторы (rAd) являются эффективным молекулярным инструментом для генной терапии и генной вакцинации. С помощью таких векторов нужные гены можно доставить и экспрессировать в клетках различных эпителиев, печени, в иммунных и кроветворных клетках животных и человека. Успех генной терапии и генной вакцинации зависит от интенсивности продукции целевого белка, кодируемого вектором. В представленной работе изучено влияние агонистов Toll-подобных рецепторов (TLR) на эффективность трансдукции и экспрессии rAd в антигенпредставляющих клетках животных и человека. Установлено, что агонисты TLR2, 4, 5, 7, 8 и 9 значительно усиливают продукцию белка в клетках, трансдуцированных rAd со вставкой гена этого белка. Эффект усиления реализуется в дендритных клетках и макрофагах, экспрессирующих цитоплазматический (GFP), мембранный (HA) или секреторный (SEAP) белки. На лабораторных мышах показано усиление экспрессии целевого белка с помощью фармацевтического агониста TLR4. В отличие от агонистов других TLR, агонист TLR3 подавляет продукцию GFP или SEAP в клетках, трансдуцированных rAd со вставкой гена этих белков. Предполагается, что усиление экспрессии целевого белка связано с активацией сигнального пути MyD88 → NF-kB, а подавление - с активацией сигнального пути TRIF → IRF. При активации обоих сигнальных путей агонистом TLR4 доминирует сигнал MyD88 → NF-kB, стимулирующий продукцию белка, кодируемого трансгеном в составе rAd.

Об авторах

А. В. Багаев

Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства\

Автор, ответственный за переписку.
Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

А. В. Пичугин

Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства

Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

Е. С. Лебедева

Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства

Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

А. А. Лысенко

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи МЗ РФ

Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

М. М. Шмаров

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи МЗ РФ

Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

Д. Ю. Логунов

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи МЗ РФ

Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

Б. С. Народицкий

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи МЗ РФ

Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

Р. И. Атауллаханов

Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства

Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

Р. М. Хаитов

Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства

Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

А. Л. Гинцбург

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи МЗ РФ

Email: ravshan.ataullakhanov@gmail.com
Россия

Список литературы

  1. Arama C., Assefaw-Redda Y., Rodriguez A., Fernández C., Corradin G., Kaufmann S.H., Reece S.T., Troye-Blomberg M. // Vaccine. 2012, V.30, №27, P.4040-4045
  2. Hoft D.F., Blazevic A., Stanley J., Landry B., Sizemore D., Kpamegan E., Gearhart J., Scott A., Kik S., Pau M.G., Goudsmit J., McClain J.B., Sadoff J. // Vaccine. 2012, V.30, №12, P.2098-2108
  3. Scallan C.D., Tingley D.W., Lindbloom J.D., Toomey J.S., Tucker S.N. // Clin. Vaccine Immunol. 2013, V.20, №1, P.85-94
  4. Sharma A., Tandon M., Bangari D.S., Mittal S.K. // Curr. Drug ther. 2009, V.4, №2, P.117-138
  5. Drugs R. D. // INGN 201: Ad-p53, Ad5CMV-p53, adenoviral // gene therapy--introgen 2007, V.8, №3, url www.ncbi.nlm.nih.gov/ pubmed/17472413, P.53-54
  6. Pearson S., Jia H., Kandachi K. // Nat. Biotechnol. 2004, V.22, №1, P.3-4
  7. Ataullakhanov R.R., Shmarov M.M., Sedova E.S., Logunov D.Yu., Pichugin A.V., Ataullakhanov R.I., Khaitov R.M. // Patent WO2013129961 A1 RU . C07K16 / 10, A61P31 / 16, C12N15 / 44, C07K14 / 11, A61K39 / 145. 2012
  8. Shmarov M.M., Sedova E.S., Verkhovskaya L.V., Rudneva I.A., Bogacheva E.A., Barykova Y.A., Shcherbinin D.N., Lysenko A.A., Tutykhina I.L., Logunov D.Y., Smirnov Y.A., Naroditsky B.S., Gintsburg A.L. // Acta Naturae. 2010, V.2, №1, P.111-118
  9. Ataullakhanov R.I., Pichugin A.V., Shishkova N.M., Masternak T.B., Malkina E.Yu., Ulyanova L.I., Stetsenko O.N. // Immunologia. 2005, №2, P.111-120
  10. Melnikova T.M., Pichugin A.V., Ataullakhanov R.I., Khaitov R.M. // Patent Application RU 2013151824, priority date 21.11.2013. 2013
  11. Graham F.L., Prevec L. // Methods in Mol. Biol. 1991, V.7, P.109-127
  12. Berger J., Hauber J., Hauber R., Geiger R., Cullen B.R. // Gene. 1988, V.66, №1, P.1-10
  13. Newton K., Dixit V.M. // Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 2012, V.4, №3
  14. Lim K.H., Staudt L.M. // Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 2013, V.5, №1
  15. Lee Y., Sohn W.J., Kim D.S., Kwon H.J. // Eur. J. Biochem. 2004, V.271, №6, P.1094-105

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Багаев А.В., Пичугин А.В., Лебедева Е.С., Лысенко А.А., Шмаров М.М., Логунов Д.Ю., Народицкий Б.С., Атауллаханов Р.И., Хаитов Р.М., Гинцбург А.Л., 2014

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах