Особенности регуляции экспрессии генов в системе рестрикциимодификации Ecl18kI

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Регуляция транскрипции в бактериальных системах рестрикции-модификации (Р-М) является важным процессом, обеспечивающим согласованную экспрессию тандема ферментов - ДНК-метилтрансферазы (МТазы) и эндонуклеазы рестрикции (ЭР), защищающих клетку от проникновения чужеродной ДНК. В данной работе исследовали С5-цитозиновую МТазу Ecl18kI (M.Ecl18kI), по структуре и свойствам практически идентичную МТазе SsoII (M.SsoII). Обе МТазы ингибируют экспрессию собственного гена и активируют экспрессию гена сопряженной ЭР, связываясь с регуляторным участком в промоторной области этих генов. Нами изучено комплексообразование M.Ecl18kI и РНК-полимеразы Escherichia coli с промоторными областями генов МТазы и ЭР, детализирован механизм регуляции экспрессии генов в системе Р-М Ecl18kI. Показано, что M.Ecl18kI конкурирует с РНК-полимеразой за связывание с промоторным участком, однако непосредственных контактов между M.Ecl18kI и РНК-полимеразой не выявлено. Изучены свойства мутантных форм М.Ecl18kI и M.SsoII. Установлено, что аминокислотные замены в N-концевой области M.Ecl18kI, выполняющей регуляторную функцию, влияют не только на способность этого белка взаимодействовать с регуляторным участком и выступать в роли фактора транскрипции, но и на его способность связывать и метилировать ДНК-субстрат. Потеря МТазой метилирующей активности не препятствует регуляции этим белком транскрипции генов в системе Р-М Ecl18kI и даже усиливает сродство к регуляторному участку. Однако наличие в молекуле M.Ecl18kI домена, ответственного за метилирование, необходимо для выполнения регуляторной функции M.Ecl18kI.

Об авторах

O. Ю. Буренина

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: kubareva@belozersky.msu.ru
Россия

E. A. Федотова

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова

Email: kubareva@belozersky.msu.ru
Россия

A. Ю. Рязанова

НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова

Email: kubareva@belozersky.msu.ru
Россия

A. С. Проценко

Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина

Email: kubareva@belozersky.msu.ru
Россия

M. В. Захарова

Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина

Email: kubareva@belozersky.msu.ru
Россия

A. С. Карягина

НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова; НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Минздравсоцразвития РФ; ВНИИ сельскохозяйственной биотехнологии РАСХН

Email: kubareva@belozersky.msu.ru
Россия

A. С. Солонин

Институт биохимии и физиологии микроорганизмов им. Г.К. Скрябина

Email: kubareva@belozersky.msu.ru
Россия

T. С. Орецкая

Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова; НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова

Email: kubareva@belozersky.msu.ru
Россия

E. A. Кубарева

НИИ физико-химической биологии им. А.Н. Белозерского Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова

Автор, ответственный за переписку.
Email: kubareva@belozersky.msu.ru
Россия

Список литературы

  1. Kobayashi I. // Nucleic Acids Research 2001, V.29, P.3742-3756
  2. Nagornykh M.O., Bogdanova E.S., Protsenko A.S., Zakharova M.V., Severinov K.V. // Russian Journal of Genetics 2008, V.44, P.523-532
  3. Karyagina A., Shilov I., Tashlitskii V., Khodoun M., Vasil’ev S., Lau P.C.K., Nikolskaya I. // Nucleic Acids Research 1997, V.25, P.2114-2120
  4. Denjmukhametov M.M., Brevnov M.G., Zakharova M.V., Repyk A.V., Solonin A.S., Petrauskene O.V., Gromova E.S. // FEBS Lett. 1998, V.433, P.233-236
  5. Zakharova M.V., Beletskaya I.V., Denjmukhametov M.M., Yurkova T.V., Semenova L.M., Shlyapnikov M.G., Solonin A.S. // Mol. Genet. Genomics 2002, V.267, P.171-178
  6. Miyahara M., Ishiwata N., Yoshida Y. // Biol. Pharm. Bull. 1997, V.20, P.201-203
  7. Ibáñez M., Alvarez I., Rodríguez-Peña J.M., Rotger R. // Gene 1997, V.196, P.145-158
  8. Protsenko A., Zakharova M., Nagornykh M., Solonin A., Severinov K. // Nucleic Acids Research 2009, V.37, P.5322-5330
  9. Fedotova E.A., Protsenko A.S., Zakharova M.V., Lavrova N.V., Alekseevsky A.V., Oretskaya T.S., Karyagina A.S., Solonin A.S., Kubareva E.A. // Biochemistry (Moscow). 2009, V.74, P.85-91
  10. Vorob’eva O.V., Vasil’ev S.A., Karyagina A.S., Oretskaya T.S., Kubareva E.A. // Molekulyarnaya Biologiya 2000, V.34, P.921-926
  11. Shilov I., Tashlitsky V., Khodoun M., Vasil’ev S., Alekseev Y., Kuzubov A., Kubareva E., Karyagina A. // Nucleic Acids Research 1998, V.26, P.2659-2664
  12. Ryazanova A.Yu., Molochkov N.V., Abrosimova L.A., Alexeevsky A.V., Karyagina A.S., Protsenko A.S., Friedhoff P., Oretskaya T.S., Kubareva E.A. // Mol. Biol. (Moscow) 2010, V.44, P.807-816
  13. Karyagina A.S., Alexeevski A.V., Golovin A.V., Spirin S.A., Vorob’eva O.V., Kubareva E.A. // Biophysics. 2003, V.48, P.S45-S55
  14. Severinov K., Darst S.A. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1997, V.94, P.13481-13486
  15. Scatchard G. // Annals New York Acad. Sci. 1949, V.51, P.660-672
  16. Callen B.P., Shearwin K.E., Egan J.B. // Trends Genet. 2005, V.21, P.339-345
  17. Vijesurier R.M., Carlock L., Blumenthal R.M., Dunbar J.C. // Journal of Bacteriology 2000, V.182, P.477-487
  18. Ryazanova A.Yu., Winkler I., Friedhoff P., Viryasov M.B., Oretskaya T.S., Kubareva E.A. // Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids. 2011, V.30, P.632-650
  19. Cheng X., Kumar S., Posfai J., Pflugrath J.W., Roberts R.J. // Cell 1993, V.74, P.299-307

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Буренина O.Ю., Федотова E.A., Рязанова A.Ю., Проценко A.С., Захарова M.В., Карягина A.С., Солонин A.С., Орецкая T.С., Кубарева E.A., 2013

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах