Кинетические характеристики и цитотоксическая активность рекомбинантных препаратов метионин-γ-лиазы Clostridium tetani, Clostridium sporogenes, Porphyromonas gingivalis и Citrobacter freundii

Обложка

Цитировать

Полный текст

Аннотация

Определены параметры стационарной кинетики пиридоксаль-5'-фосфат-зависимой рекомбинантной метионин-γ-лиазы из трех патогенных бактерий - Clostridium sporogenes, Clostridium tetani и Porphyromonas gingivalis в реакциях γ- и β-элиминирования. Наибольшую каталитическую эффективность в реакции γ-элиминирования L-метионина имеет фермент из C. sporogenes. Показано, что фермент из этих трех источников является тетрамером, а наличие полигистидинового фрагмента на N-концах полипептидных цепей рекомбинантных ферментов влияет на их каталитическую активность и в условиях денатурации способствует агрегации мономеров с образованием димерных форм. На культурах опухолевых клеток K562, PC-3, LnCap, MCF7, SKOV-3, L5178y оценена цитотоксичность метионин–γ-лиазы C. sporogenes и C. tetani в сравнении с ферментом из Citrobacter freundii. Наиболее чувствительными были культуры клеток – K562, PC-3 и MCF7 - IC 50 = 0.4-1.3, 0.1-0.4 и 0.04-3.2 ед./мл соответственно.

Об авторах

E. A. Морозова

Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН

Email: vadimpokrovsky@yandex.ru
Россия

В. В. Куликова

Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН

Email: vadimpokrovsky@yandex.ru
Россия

Д. В. Яшин

Институт биологии гена РАН

Email: vadimpokrovsky@yandex.ru
Россия

Н. В. Ануфриева

Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН

Email: vadimpokrovsky@yandex.ru
Россия

Н. Ю. Анисимова

Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН

Email: vadimpokrovsky@yandex.ru
Россия

С. В. Ревтович

Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН

Email: vadimpokrovsky@yandex.ru
Россия

M. И. Котлов

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи МЗ Российской Федерации

Email: vadimpokrovsky@yandex.ru
Россия

Ю. Ф. Белый

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи МЗ Российской Федерации

Email: vadimpokrovsky@yandex.ru
Россия

В. С. Покровский

Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН

Автор, ответственный за переписку.
Email: vadimpokrovsky@yandex.ru
Россия

T. В. Демидкина

Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН

Email: tvd@eimb.ru
Россия

Список литературы

  1. Tanaka H., Esaki N., Soda K. // EnzymeMicrob. Technol. 1985, V.7, P.530-537
  2. El-Sayed A.S. // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2010, V.86, P.445-467
  3. Nakayama T., Esaki N., Lee W.-J., Tanaka I., Tanaka H., Soda K. // Agric. Biol. Chem. 1984, V.48, P.2367-2369
  4. Kreis W., Hession C. // Cancer Research 1973, V.33, P.1862-1865
  5. Yoshimura M., Nakano Y., Yamashita Y., Oho T., Saito T., Koga T. // Infection Immunity. 2000, V.68, P.6912-6916
  6. Tokoro M., Asai T., Kobayashi S., Takeuchi T., Nozaki T. // J. Biol. Chem. 2003, V.278, P.42717-42727
  7. Lockwood B., Coombs G. // Biochem. J. 1991, V.279, P.675-682
  8. Cellarier E., Durando X., Vasson M.P., Farges M.C., Demiden A., Maurizis J.C., Madelmont J.C., Chollet P. // Cancer Treat Rev. 2003, V.29, P.488-489
  9. Yoshioka T., Wada T., Uchida N., Maki H., Yoshida H., Ide N., Kasai H., Hojo K., Shono K., Maekawa R. // Cancer Research 1998, V.58, P.2583-2587
  10. Miki K., Xu M., An Z., Wang X., Yang M., Al-Refaie W., Sun X., Baranov E., Tan Y., Chishima T. // Cancer Gene Ther. 2000, V.7, P.332-338
  11. Miki K., Al-Refaie W., Xu M., Jiang P., TanY. I.O., Bouvet M., Zhao M., Gupta A., Chishima T., Shimada H. // Cancer Research 2000, V.60, P.2696-2702
  12. Tan Y., Xu M., Hoffman R.M. // Anticancer Res. 2010, V.30, P.1041-1046
  13. El-Sayed A.S., Shouman S.A., Nassrat H.M. // Enzyme Microb. Technol. 2012, V.51, P.200-210
  14. Revtovich S.V., Morozova Е.А., Anufrieva N.V., Kotlov M.I., Belyi Y.F., Demidkina T.V. // Dokl. Biochem. Biophys. 2012, V.445, P.187-193
  15. Studier F.W. // ProteinExpr. Purif. 2005, V.41, P.207-234
  16. Manukhov I.V., Mamaeva D.V., Morozova E.A., Rastorguev S.M., Faleev N.G., Demidkina T.V., Zavilgelsky G.B. // Biochemistry (Mosc). 2006, V.71, P.454-463
  17. Morozova E.A., Bazhulina N.P., Anufrieva N.V., Mamaeva D.V., Tkachev Y.V., Streltsov S.A., Timofeev V.P., Faleev N.G., Demidkina T.V. // Biochemistry (Mosc). 201, V.75, P.1435-1445
  18. Laemmli U.K. // Nature 1970, V.227, P.680-685
  19. Meyer T.S., Lamberts B.L. // Biochim. Biophys. Acta . 1965, V.107, P.144-145
  20. Towbin H., Staehelin T., Gordon J. // Proc.Natl.Acad.Sci. USA. 1979, V.76, P.4350-4354
  21. Mossman T. // J. Immunol. Methods. 1983, V.65, P.55-63
  22. Xu W., Zhang X., Qian H., Zhu W., Sun X., Hu J., Zhou H., Chen Y. // Exp.Biol.Med. 2004, V.229, P.623-631
  23. Tan Y., Xu M., Hoffman R.M. // Anticancer Res. 2010, V.30, P.141-1046
  24. Kudou D., Misaki S., Yamashita M., Tamura T., Esaki N., Inagaki K. // Biosci. Biotechnol. Biochem. 2008, V.72, P.1722-1730
  25. Nakayama T., Esaki N., Sugie K., Berezov T.T., Tanaka H., Soda K. // Anal. Biochem. 1884, V.138, P.421-424
  26. Mamaeva D.V., Morozova E.A., Nikulin A.D., Revtovich S.V., Nikonov S.V., Garber M.B., Demidkina T.V. // Acta Cryst. 2005, V.61, P.546-549
  27. Chant A., Kraemer-Pecore C.M., Watkin R., Kneale G.G. // Protein Expr. Purif. 2005, V.39, P.152-159
  28. Wu J., Filutowicz M. // Acta Biochem. Pol. 1999, V.46, P.591-599
  29. Esteban-Torres M., Alvarez Y., Acebrón I., de las Rivas B., Muñoz R., Kohring G.W., Roa A.M., Sobrino M., Mancheño J.M. // FEBS Lett. 2012, V.586, P.3127-3133
  30. Pokrovskaya M.V., Aleksandrova S.S., Pokrovsky V.S., Omeljanjuk N.M., Borisova A.A., Anisimova N.Yu., Sokolov N.N. // Protein Expr. Purif. 2012, V.82, P.150-154
  31. Sokolov N.N., Zanin V.A., Aleksandrova S.S. // Aspects of medicinal chemistry // Vopr. Med. Khim. 2000, V.46, P.531-548
  32. Krasotkina Y.V., Gladilina Y.A., Borisova А.А., Gervaziev Y.V., Abakumova О.Y., Zanin V.А., Sokolov N.N. // Aspects of biological, medical and pharmaceutical chemistry // Vopr. Biol. Med. Pharm. Chem. 2008, №3, P.18-21

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Морозова E.A., Куликова В.В., Яшин Д.В., Ануфриева Н.В., Анисимова Н.Ю., Ревтович С.В., Котлов M.И., Белый Ю.Ф., Покровский В.С., Демидкина T.В., 2013

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах