Acta NaturaeActa NaturaeActa Naturae2075-8251Acta Naturae Ltd1063610.32607/20758251-2012-4-1-74-77Research ArticlesЭкспериментальные статьиResearch ArticleConformational Differences between Active Angiotensins and Their Inactive PrecursorsКонформационные отличия активных ангиотензинов от их неактивных предшественниковSolopovaO. N.СолоповаO. Н.
Russian Federation
solopova@msn.comPozdnyakovaL. P.ПоздняковаЛ. П.
Russian Federation
solopova@msn.comVarlamovN. E.ВарламовН. E.
Russian Federation
solopova@msn.comBokovM. N.БоковM. Н.
Russian Federation
solopova@msn.comMorozkinaE. V.МорозкинаE. В.
Russian Federation
solopova@msn.comYagudinТ. А.ЯгудинТ. А.
Russian Federation
solopova@msn.comSveshnikovP. G.СвешниковП. Г.
Russian Federation
solopova@msn.comRussian Research Center for Molecular Diagnostics and TherapyОАО «Всероссийский научный центр молекулярной диагностики и лечения»Bach Institute of Biochemistry, Russian Academy of SciencesИнститут биохимии им. А.Н. Баха РАН1503201241VOL 4, NO1 (2012)ТОМ 4, №1 (2012)747717012020Copyright ©; 2012, Solopova O.N., Pozdnyakova L.P., Varlamov N.E., Bokov M.N., Morozkina E.V., Yagudin Т.А., Sveshnikov P.G.Copyright ©; 2012, Солопова O.Н., Позднякова Л.П., Варламов Н.E., Боков M.Н., Морозкина E.В., Ягудин Т.А., Свешников П.Г.2012Solopova O.N., Pozdnyakova L.P., Varlamov N.E., Bokov M.N., Morozkina E.V., Yagudin Т.А., Sveshnikov P.G.Солопова O.Н., Позднякова Л.П., Варламов Н.E., Боков M.Н., Морозкина E.В., Ягудин Т.А., Свешников П.Г.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://actanaturae.ru/2075-8251/article/view/10636

The peptide conformation in the context of a protein polypeptide chain is influenced by proximal amino acid residues. However, the mechanisms of this interference remain poorly understood. We studied the conformation of angiotensins 1, 2 and 3, which are produced naturally in a sequential fashion from a precursor protein angiotensinogen and contain an identical peptide core structure. Using the example of angiotensins 1, 2 and 3, it was shown that similar amino acid sequences may have significant conformational differences in various molecules. In order to assess the conformational changes, we developed a panel of high-affinity mouse monoclonal antibodies against angiotensins 1, 2 and 3 and studied their cross-reactivity in indirect and competitive ELISAs. It was found that the conformations of inactive angiotensin1 and the corresponding fragment of angiotensinogen are similar; the same is true for the conformations of active angiotensins 2 and 3, whereas the conformations of homologous fragments in the active and inactive angiotensins differ significantly.

Вопрос о влиянии аминокислотного окружения определенных участков белка на их конформацию остается малоизученным. На примере ангиотензинов 1, 2 и 3 - метаболитов ангиотензиногена, мы показали, что одни и те же аминокислотные последовательности в составе разных молекул могут иметь существенные конформационные различия. С этой целью получены высокоаффинные моноклональные антитела против ангиотензинов 1, 2 и 3 и изучена их кросс-реактивность между разными ангиотензинами и ангиотензиногеном. Сделан вывод о том, что конформации неактивных молекул - ангиотензина 1 и соответствующего участка ангиотензиногена - сходны между собой, конформации активных ангиотензинов 2 и 3 также сходны между собой, тогда как конформации гомологичных участков у активных и неактивных ангиотензинов существенно отличаются.

peptidesconformationangiotensinsangiotensinogenmonoclonal antibodiesпептидыконформацияангиотензиныангиотензиногенмоноклональные антителаThis work was supported by the Government Contract No. 16.512.12.2012 “Creation of Producer Strains of Humanized Recombinant Fab Fragments against Tumor Necrosis Factor-Alpha and Active Precursors of Angiotensins”.Работа выполнена в рамках Государственного контракта № 16.512.12.2012 «Создание штаммов-продуцентов рекомбинантных гуманизированных Fab-фрагментов к фактору некроза опухоли альфа и предшественникам активных ангиотензинов».Kohler G., Milstein C. // Nature. 1975. V. 256. P. 495-497.Sveshnikov P.G., Malaitsev V.V., Bogdanova I.M., Solopova O.N. Vvedenie v molekulyarnuyu immunologiyu i gibridomnuyu tehnologiyu (Introduction into molecular immunology and hybridoma technology). M.: MSU, 2006.de Gasparo M., Catt K.J., Inagami T., Wright J.W., Unger T. // Pharmacol. Rev. 2000. V. 52. P 415-472.Boucher R., Demassieux S., Garcia R., Genest J. // Circ. Res. 1977. V. 41. P 26-29.WO2005/028510. Methods, Kits and Compositions for the Developments and Use of Monoclonal Antibodies Specific to Antigens of Low Immunogenecity. Patent USA. 2005.Sveshnikov P.G., Gorodetskaya S.B., Shemchukova O.B., Solopova O.N., Bokov M.N., Varlamov N.E., Ulianov A.M., Lyutova E.M., Kiselev V.I., Budarina S.O., Ashrafian L.A. // Molecular Medicine. 2009. V. 4. P. 45-50.Engvall E., Perlmann P. // Immunochemistry. 1971. V. 8. № 9. P 871-874.Engvall E., Jonsson K., Perlmann P. // Biochim. Biophys. Acta. 1971. V. 28. 251. № 3. P. 427-434.Jungbauer A., Tauer C., Reiter M., Purtscher M., Wenisch E., Steindl F., Buchacher A., Katinger H. // J. Chromatogr. 1989. V. 476. P. 257-268.Laemmli U.K. // Nature. 1970. V. 227. P 680-685.Klotz I.M. The Proteins / Eds Neurath H., Bailey K. N.Y.: Acad. Press. V. 1. 1953. P 727.Friguet B., Chaffotte A.F., Djavadi-Ohaniance L., Goldberg M.E. // J. Immunol. Methods. 1985. V. 77. P. 305-319.Clouston W.M., Evans B.A., Haralambidis J., Richards R.I. // Genomics. 1988. V. 2. Р 240-248.