Acta NaturaeActa NaturaeActa Naturae2075-8251Acta Naturae Ltd1034110.32607/20758251-2018-10-2-30-36Research ArticlesЭкспериментальные статьиResearch ArticleThe Development and Study of Recombinant Immunoglobulin A to Hemagglutinins of the Influenza VirusПолучение и исследование свойств рекомбинантного иммуноглобулина А, специфичного к гемагглютининам вируса гриппаAlievT. K.АлиевТ. К.
Russian Federation
ta12345@list.ruDement’yevaI. G.ДементьеваИ. Г.
Russian Federation
ta12345@list.ruToporovaV. A.ТороповаВ. А.
Russian Federation
ta12345@list.ruArgentovaV. V.АргентоваВ. В.
Russian Federation
ta12345@list.ruPozdnyakovaL. P.ПоздняковаЛ. П.
Russian Federation
ta12345@list.ruBokovM. N.БоковМ. Н.
Russian Federation
ta12345@list.ruVotchitsevaYu. A.ВотчицеваЮ. А.
Russian Federation
ta12345@list.ruDolgikhD. A.ДолгихД. А.
Russian Federation
ta12345@list.ruVarfolomeyevS. D.ВарфоломеевС. Д.
Russian Federation
ta12345@list.ruSveshnikovP. G.СвешниковП. Г.
Russian Federation
ta12345@list.ruKirpichnikovM. P.КирпичниковМ. П.
Russian Federation
ta12345@list.ruLomonosov Moscow State UniversityМосковский государственный университет им. М.В. ЛомоносоваRussian Research Center for Molecular Diagnostics and TherapyВсероссийский научный центр молекулярной диагностики и леченияShemyakin-Ovchinnikov Institute of Bioorganic Chemistry, Russian Academy of SciencesИнститут биоорганической химии имени академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН15062018102VOL 10, NO2 (2018)ТОМ 10, №2 (2018)303617012020Copyright ©; 2018, Aliev T.K., Dement’yeva I.G., Toporova V.A., Argentova V.V., Pozdnyakova L.P., Bokov M.N., Votchitseva Y.A., Dolgikh D.A., Varfolomeyev S.D., Sveshnikov P.G., Kirpichnikov M.P.Copyright ©; 2018, Алиев Т.К., Дементьева И.Г., Торопова В.А., Аргентова В.В., Позднякова Л.П., Боков М.Н., Вотчицева Ю.А., Долгих Д.А., Варфоломеев С.Д., Свешников П.Г., Кирпичников М.П.2018Aliev T.K., Dement’yeva I.G., Toporova V.A., Argentova V.V., Pozdnyakova L.P., Bokov M.N., Votchitseva Y.A., Dolgikh D.A., Varfolomeyev S.D., Sveshnikov P.G., Kirpichnikov M.P.Алиев Т.К., Дементьева И.Г., Торопова В.А., Аргентова В.В., Позднякова Л.П., Боков М.Н., Вотчицева Ю.А., Долгих Д.А., Варфоломеев С.Д., Свешников П.Г., Кирпичников М.П.https://creativecommons.org/licenses/by/4.0https://actanaturae.ru/2075-8251/article/view/10341

We obtained recombinant variants of human antibody FI6 broadly specific to hemagglutinins of the influenza A virus. On the basis of a bi-promoter (CMV, hEF1-HTLV) vector, we developed genetic constructs for the expression of the heavy and light chains of the immunoglobulins of IgA1-, IgA2m1-, and IgG-isotypes. Following transfection and selection, stable Chinese hamster ovary (CHO) cell lines were produced. The antibodies of IgA1-, IgA2m1-, and IgG-isotypes were purified from culture media. We performed an immunochemical characterization and studied their interactions with influenza A strains of the H1N1- and H3N2-subtypes. It was shown that recombinant FI6 variants of the IgA-isotype retain the properties of the parental IgG antibody to demonstrate specificity to all the strains tested. The strongest binding was observed for the H1N1 subtype, which belongs to hemagglutinins of phylogenetic group I.

Получены рекомбинантные варианты человеческого антитела FI6, проявляющие широкую специфичность к гемагглютининам вируса гриппа А. На основе бипромоторного вектора (CMV, hEF1-HTLV) получены генетические конструкции, экспрессирующие тяжелую и легкую цепи иммуноглобулинов IgA1-,IgA2m1- и IgG-изотипов. В результате трансфекции и селекции клеток СНО яичников китайского хомячка получены клеточные линии, стабильно экспрессирующие указанные антитела. Иммуноглобулины изотипов IgA1, IgA2m1 и IgG выделены из культуральной жидкости. Определены иммунохимические характеристики антител, изучено взаимодействие рекомбинантных иммуноглобулинов со штаммами вируса гриппа А подтипов H1N1 и H3N2. Показано, что рекомбинантные варианты FI6 IgA-изотипа проявляют, как и исходное антитело, специфичность в отношении всех исследуемых штаммов. При этом наибольший уровень связывания достигается для подтипа H1N1, относящегося к гемагглютининам филогенетической группы I

Influenza A virusbroadly neutralizing antibodiesimmunoglobulin AIgA1IgA2m1recombinant antibodiesвирус гриппа Ашироко нейтрализующие антителаиммуноглобулин АIgA1IgA2m1рекомбинантные антителаThis study was supported by the Ministry of Education and Science of the Russian Federation (No. 14.607.21.0060) within the framework of a Federal Program “Research and Developments for Priority Areas of the Development of Scientific and Technological Complex in Russia for 2014–2020 years” (unique project identification RFMEFI60714X0060).Работа выполнена при финансовой поддержке субсидии (соглашение № 14.607.21.0060), выделяемой Министерством образования и науки Российской Федерации в рамках реализации Федеральной целевой программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014–2020 годы» (уникальный идентификатор проекта RFMEFI60714X0060).[1] Gerhard W. // Curr. Top. Microbiol. Immunol. 2001, V.260, P.171-190[2] Lachmann P. // Emerging Microbes Infections. 2012, V.1, 10.1038/emi.2012.2[3] Throsby M., van den Brink E., Jongeneelen M., Poon L.L., Alard P., Cornelissen L., Bakker A., Cox F., van Deventer E., Guan Y. // PLoS One. 2008, V.3, e3942[4] Sui J., Hwang W.C., Perez S., Wei G., Aird D., Chen L.M., Santelli E., Stec B., Cadwell G., Ali M. // Nat. Struct. Mol. Biol. 2009, V.16, P.265-273[5] Friesen R.H., Koudstaal W., Koldijk M.H., Weverling G.J., Brakenhoff J.P., Lenting P.J., Stittelaar K.J., Osterhaus A.D., Kompier R., Goudsmit J. // PLoS One. 2010, V.5, e9106[6] Wrammert J., Koutsonanos D., Li G.M., Edupuganti S., Sui J., Morrissey M., McCausland M., Skountzou I., Hornig M., Lipkin W.I. // J. Exp. Med. 2011, V.208, №1, P.181-193[7] Grandea A.G., Olsen O.A., Cox T.C., Renshaw M., Hammond P.W., Chan-Hui P.Y., Mitcham J.L., Cieplak W., Stewart S.M., Grantham M.L. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010, V.107, №28, P.12658-12663[8] Corti D., Voss J., Gamblin S.J., Codoni G., Macagno A., Jarrossay D., Vachieri S.G., Pinna D., Minola A., Vanzetta F. // Science. 2011, V.333, №6044, P.850-856[9] Tamura S., Kurata T. // Jpn J. Infect. Dis. 2004, V.57, №6, P.236-247[10] Weltzin R., Monath T.P. // Clin. Microbiol. Rev. 1999, V.12, №3, P.383-393[11] Jianqiang Y., Hongxia S., Perez D.R. // Immunotherapy. 2012, V.4, №2, P.175-186[12] Bakema J.E., van Egmond M. // MAbs. 2011, V.3, №4, P.352-361[13] Aliev T.K., Dement’yeva I.G., Toporova V.A., Bokov M.N., Pozdnyakova L.P., Rybchenko V.S., Dolgikh D.A., Sveshnikov P.G., Kirpichnikov M.P. // Mocow Univ. Biol. Sci. Bull. 2016, №2, P.25-31[14] Aliev T.K., Balabashin D.S., Dolgikh D.A., Kirpichnikov M.P., Panina A.A., Toporova V.A. // Patent of the Russian Federation № 2555533. 2015[15] Kavran J.M., Leahy D.J. // Methods Enzymol. 2014, V.541, P.27-34[16] Friguet B., Chaffotte A.F., Djavadi-Ohaniance L., Goldberg M.E. // J. Immunol. Methods. 1985, V.77(2), P.305-319[17] Klotz I.M. // Arch. Biochem. 1946, V.9, P.109-117[18] Delacroix D.L., Dive C., Rambaud J.C., Vaerman J.P. // Immunology. 1982, V.47, №2, P.383-385[19] Tomana M., Niedermeier W., Mestecky J., Skvaril F. // Immunochemistry. 1976, V.13, №4, P.325-328[20] Chintalacharuvu K.R., Raines M., Morrison S.L. // J. Immunol. 1994, V.152, №11, P.5299-5304[21] Feshchenko E., Rhodes D.G., Felberbaum R., McPherson C., Rininger J.A., Post P., Cox M.M.J. // BMC Biotechnology. 2012, url http://www.biomedcentral.com/1472-6750/12/77[22] Mak T.M., Hanson B.J., Tan Y.J. // Antiviral Res. 2014, V.107, P.76-83