The protein photosensitizer miniSOG is a promising agent for photodynamic therapy. The genetically encoded phototoxins 4D5scFv-miniSOG and DARPin-miniSOG specifically bind to the HER2 receptor overexpressed on the surface of cancer cells and promote receptor-mediated internalization of HER2. We show that ingestion of proteins in a complex with the receptor reduces the fluorescent signal of the phototoxic module in endosomes. In order to clarify the mechanism of decrease in the fluorescence intensity of miniSOG-based proteins as they enter a cancer cell during internalization, we analyzed the influence of different factors, including low pH, proteolysis, cofactor reduction, and shielding, on changes in the fluorescence of photosensitizers. Shielding and absorption of miniSOG fluorescence by cell fluorophores, including cytochrome c, were found to contribute significantly to the changes in the fluorescent properties of miniSOG.
Белковый фотосенсибилизатор miniSOG является перспективным агентом для фотодинамической терапии. Генетически кодируемые фототоксины 4D5scFv-miniSOG и DARPin-miniSOG способны специфически связываться с онкомаркером HER2, который сверхэкспрессируется на поверхности раковых клеток, а также способствовать его интернализации. Установлено, что попадание белков в комплексе с этим рецептором в эндосомы приводит к падению флуоресцентного сигнала фототоксического модуля. С целью выяснения механизма угасания флуоресценции проанализировано влияние таких факторов, как низкие значения pH, протеолиз, восстановление кофактора и др. Обнаружено, что значимый вклад в изменение флуоресцентных свойств вносит экранирование и поглощение флуоресценции miniSOG флуорофорами клетки, в том числе цитохромом с.